Набор для диагностики токсоплазмоз животных

по лабораторной диагностике

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1.1. Токсоплазмоз – протозойное заболевание животных и человека, вызываемое внутриклеточным паразитом (toxoplasma gondii), протекает остро и хронически. Заболевание животных токсоплазмозом наблюдают в любое время года.

Болезнь регистрируется во всех странах мира.

1.2. Развитие возбудителя проходит в организме дефинитивного и промежуточного хозяев.

1.3. Дефинитивными хозяевами токсоплазмы являются кошка, рысь, оцелот, пума и другие кошачьи; промежуточными – домашние и дикие млекопитающие (грызуны, плотоядные, всеядные, насекомоядные, сумчатые, птицы, приматы и человек), известно около 350 видов.

1.4. Диагноз на токсоплазмоз ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований (микроскопического, биологического, серологического и копрологического).

1.5. В лабораторию для исследования на токсоплазмоз направляют:- от подозрительных животных (бесплодие невыясненной этиологии, аборты, рождение уродливых, нежизнеспособных плодов), пробы сывороток крови (1-2 куб.см нативной или консервированной 5%-ным раствором фенола (1 капля на 1 куб.см сыворотки) или сухой борной кислотой (2-4% к объему), мертворожденный или

абортированный плод (от серопозитивного или серосомнительного животного) целиком или его паренхиматозные органы, головной мозг, глаза и кусочки плаценты;- от павших или вынуждено убитых – сердце, легкие, печень, селезенку, почки, лимфатические узлы и головной мозг;- от кошек – пробы фекалий.

1.6. Отобранный патологический материал и пробы фекалий во влаго-непроницаемой таре доставляют в лабораторию в день отбора, сыворотку крови — не позднее 2 дн. с момента взятия, абортированный или мертворожденный плод – не позднее 12ч после аборта или рождения. Через сутки после смерти процент обнаружения возбудителя резко снижается.

1.7. Лабораторные исследования на токсоплазмоз включает:- обнаружение эндозоитов, цист в патологическом материале и ооцист токсоплазмы в фекалиях методом световой микроскопии;

– выделение эндозоитов или цист токсоплазмы на белых мышах с последующей дифференциацией возбудителей;

2. МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.1. Из патологического материала делают по 2 мазка. При исследовании абортированного плода делают мазки из сердца, легких, печени, почек, селезенки, лимфатических узлов, мышц глаза и экссудата грудной и брюшной полостей.

Жидкий материал наносят стерильной пипеткой на предметное стекло, размазывают и сушат на воздухе. Экссудат грудной и брюшной полостей предварительно центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 мин и мазки готовят из осадка. При исследовании плаценты делают разрез котиледона и делают мазки-отпечатки.

2.2. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют этиловым спиртом в течение 10-15 мин, окрашивают по Романовскому (1-2 капли краски азур-эозина на 1 куб.см дистиллированной воды рН 7,0-7,2) в течение 30-60 мин (зависит от качества краски), промывают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и исследуют под иммерсионной системой микроскопа.

2.3. При микроскопии препаратов эндозоиты токсоплазмы имеют форму дольки апельсина (полумесяца) с заостренным передним концом. Цитоплазма эндозоитов окрашивается в голубой цвет различной интенсивности, ядро – в красный или красно-фиолетовый.

В клетках разных органов путем размножения эндозоитов (до нескольких десятков) формируются псевдоцисты, не имеющие собственной оболочки. Наличие эндозоитов характерно для острой стадии токсоплазменного процесса.

В мазках из головного мозга, сетчатки глаза и мышечных органах обнаруживают цисты шарообразной формы около 100 мкм в диаметре, окружены плотной оболочкой. В них могут находиться сотни и тысячи цистозоидов. Цисты могут быть и вне клеток. Наличие цист характерно для хронического течения токсоплазмоза.

2.4. Результат микроскопического исследования считают положительным при обнаружении в мазках эндозоитов или цист токсоплазмы.

3. БИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

3.1. Для биологической пробы используют тот же материал, что и для микроскопического исследования. Возбудитель выделяют методом слепых пассажей на белых мышах.

3.2. Материал растирают в ступке со стерильным песком и заливают физиологическим раствором в соотношении 1:3 или 1:5. Плаценту предварительно обрабатывают тампонами, смоченными дезинфицирующим раствором, подсушивают сухими стерильными тампонами, затем вырезают кусочки размером 0,5х0,5 см, фламбируют их на пламени горелки и растирают в ступке. В полученную суспензию добавляют антибиотики из расчета 1000 ЕД пенициллина и 0,05 г стрептомицина на 1

см3 суспензии. Суспензию выдерживают 1 ч при комнатной температуре. Перед заражением суспензию встряхивают, когда частички осядут на дно, набирают надосадочную жидкость и вводят 2-3 белым мышам весом 20-23 г внутрибрюшинно или подкожно в дозе 0,5-1 куб.см. Суспензию можно набирать шприцом через стерильный ватный тампон. Место инъекции обрабатывают 7%-ной настойкой йода на 96° этиловом спирте.

3.3. С целью обогащения материала цистами применяют метод искусственного переваривания в желудочном соке. Патологический материал (кусочки внутренних органов, плаценты, мышц) тщательно измельчают, 50 г фарша помещают в колбу емкостью 1 куб.дм и заливают 10 объемами (по массе) искусственного желудочного сока следующего состава: пепсин – 1,3 г, натрий хлорид – 2,5 г, кислота соляная концентрированная – 3,5 куб.см, вода дистиллированная – 500 куб.см. Колбу помещают в термостат при 36°С на 1 или 1,5 часа, периодически встряхивая.

Полученную массу центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость осторожно сливают, осадок промывают стерильным физиологическим раствором, ресуспендируют в двойном объеме этого же раствора и после добавления антибиотиков выдерживают 1 ч при комнатной температуре и вводят внутрибрюшинно 2-3 белым мышам в дозе 1 куб.см.

3.4. При наличии в материале токсоплазм животные гибнут в течение 7-10 дней. У павших от токсоплазмоза мышей в брюшной полости образуется экссудат, в котором содержится большое количество эндозоитов токсоплазмы. Возбудитель обнаруживают также в мазках-отпечатках из печени, селезенки, легких, почек, лимфатических узлов.

3.5. Если в указанные сроки белые мыши, зараженные исходным материалом, не заболевают, их убивают на 10-й день, из паренхиматозных органов готовят суспензию (см. п.3.2.), которой заражают 2-3 белых мышей (второй пассаж). Если мыши не гибнут, аналогично проводят третий пассаж. При вскрытии мышей могут обнаружить в экссудате и паренхиматозных органах эндозоитов, а в головном мозге – цисты токсоплазмы.

3.6. Для подавления резистентности белых мышей во втором и третьем пассажах им рекомендуется вводить гидрокортизон внутримышечно в дозе 0,05 куб.см 1 раз в день в течение 3 дн подряд перед заражением.

3.7. Результат исследования считают положительным в случае обнаружения и дифференциации токсоплазм в патологическом материале.

3.8. Токсоплазм необходимо дифференцировать от саркоцист, безноитий, лейшманий, неоспор, энцефалитозоон. Дифференциация основана на изучении морфологии возбудителей, их локализации, патогенности для белых мышей, круга хозяев. При определении возбудителя пользуются таблицей.

Токсоплазмоз

Toxoplasma gondii, является облигатным внутриклеточным паразитом, который может поражать ЦНС теплокровных животных, в том числе человека. Кошки заражаются возбудителями токсоплазмоза, поедая мышевидных грызунов, органы и ткани промежуточных хозяев, пораженных и содержащих эндозоиты и цисты (при хронической инвазии). Кошки играют важную роль в распространении токсоплазмоза, потому что они единственные млекопитающие, которые передают ооцисты со своими экскрементами. В дальнейшем ооцисты мигрируют в мышцы и головной мозг.

T. gondii также может передаваться через плаценту и с молоком матери. Итак, основными источниками инфекции для кошек являются сырое мясо, зараженная добыча, внутриутробное заражение котят или же в подсосный период. Но у здоровых кошек, инфекция обычно протекает бессимптомно.

Заболевание протекает остро и хронически. При остром течении инвазии у кошек отмечают расстройство пищеварительного канала, повышение температуры, наблюдаются истечения из носа и глаз. У больных самок могут быть аборты и рождаются уроды. Гибель животного наступает в течение 1-2 недель.

Хроническое течение токсоплазмоза кошек характеризуется теми же признаками, что и острое, однако они менее выражены.

Почему надо делать ИммуноКомб сначало, а потом возможно только делать исследование фекальные на ооцисты.

Измерения антител к T. gondii в крови – это лучший метод для диагностики токсоплазмоза. Иногда ооцисты можно найти в фекалиях кошки, но выглядят они настолько похоже на некоторых других паразитов, что это не является надежным методом диагностики. Кроме того, кошки выделяют ооцисты только в течение короткого периода времени (около 2-3 недель), и часто больше не происходит их выделения, хотя имеются все клинические признаки заболевания. ПЦР так же может быть использован для подтверждения инфекции и для контроля эффективности лечения.

Из всех существующих серологических методов: РПГА, Иммунофлюоресцентный анализ, планшетный ИФА, точечный анализ с использованием вторичных антител, меченных ферментом – ИммуноКомб ® является наиболее лёгким, удобным и надежным методом.

Преимущества набора ИммуноКомб® FELINE TOXOPLASMA & CHLAMYDOPHILA ANTIBODY TEST KIT

Комбинированная диагностика уровня антител

Набор для диагностики уровня антител к токсоплазме и Chlamydophila у кошек ИммуноКомб® является единственным набором, который, насколько нам известно, дает возможность одновременно выполнить точечный иммуноферментный анализ на основе серологического анализа на токсоплазмоз и хламидиоз.

Поскольку этот набор анализирует два антигена одновременно, экономятся время, труд и финансовые затраты. Кроме того, так как оба анализа являются зоонозами,то они весьма важны для диагностики.

Сравнение набора для диагностики уровня антител к токсоплазме и Chlamydophila у кошек ИммуноКомб® с количественным иммунофлуоресцентным анализом (МФА)

МФА является методом серологического анализа на токсоплазму и Chlamydophila у кошек.

Для проведения количественного иммунофлуоресцентного анализа (КИФА) понадобятся лаборатория, микроскоп и обученный лаборант для обнаружения флуоресценции при ультрафиолетовом облучении.Уникальность и инновация набора для диагностики уровня антител к токсоплазме и Chlamydophila у кошек Иммунокомб® состоит в том, что его можно использовать в лаборатории или клинике без задействования специального лабораторного оборудования или специально обученного технического персонала, что, в свою очередь, экономит время, деньги и специализированные ресурсы. Этот набор самодостаточен, в нем содержатся все необходимые реагенты для выполнения анализа.

Доступность

Серологический анализ на Chlamydophila у кошек не является общедоступным1. Этот метод дает ветеринарам уникальную возможность проведения серологического анализа на Chlamydophila.

Основные области применения набора для диагностики уровня антител к токсоплазме и Chlamydophila у кошек ИммуноКомб®:

(1) Кошки, зараженные токсоплазмозом или хламидиозом, как правило, имеют высокий уровень определенных антител. Поэтому, серо-негативные результаты на T. gondii и Chlamydophila sp. у больного животного дает возможность исключить эти две инфекции.

(2) Анализ на антитела может быть использован для обследования на наличие токсоплазмы и Chlamydophila у кошек перед поселением их в незараженых патогенами домах или же в питомниках.

МИФЫ о токсоплазмозе.

Миф первый: токсоплазмозом можно заразиться, убирая кошачий туалет

Для того, чтобы токсоплазмы стали заразными, им необходимо созреть, на это требуется от одного до пяти дней! Поэтому нельзя заразиться токсоплазмозом, удаляя свежие фекалии кошки. Следует ежедневно убирать кошачий туалет, смывать с него следы фекалий, а затем мыть руки.

Миф второй: заразна любая заболевшая кошка

После заражения кошки токсоплазмозом выделение цист продолжается до трех недель, потом этот процесс прекращается. Поэтому источником заражения являются фекалии только тех кошек, которые заразились недавно.

Но надо помнить, что кошка вновь становится на некоторое время заразной при каждом новом заражении (!), которое может произойти, если она получает сырое мясо или охотится на мышей или, гуляя, заражается через цисты других кошек.

Записаться на Прием

и Ваш питомец будет здоров

Мы выполняем рассылку не чаще чем раз в месяц

Токсоплазмоз – паразитарная инфекция, которая способна поражать организм человека и животных. Возбудитель – Toxoplasma gondii. Патология широко распространена во всем мире. Пик заболеваемости наблюдается в Южной Америке и Африке – около 90% населения. В Европе и Северной Америке этот показатель несколько ниже, но все равно высокий – от 30 до 50%. Особенность болезни – бессимптомное течение в части случаев и клинические формы, которые сопровождаются пестрой клинической картиной с различными симптомами.

Токсоплазмоз бывает острым и хроническим. Если произошла хронизация процесса, симптомы проявляются достаточно вяло или вообще отсутствуют. Различают также врожденный и приобретенный процесс. Заболевание может передаваться от матери к ребенку и поражает плод во время внутриутробного развития. Такое заражение может привести к гибели эмбриона или развитию тяжелых пороков, ведь возбудитель влияет на системы и органы, которые только формируются. Приобретенная форма поражает внутренний органы, нервную систему.

Главный источник заражения – домашние животные, преимущественно, кошки. Особенно опасно общение с ними для беременных женщин. Есть и промежуточные хозяева токсоплазмы, другие животные, в которых возбудитель находится в форме цист. Контакт с ними не приводит к заражению. А вот употребление мяса в пищу – да. Это касается свинины, баранины. Это еще один способ инфицирования. Возбудитель не погибает, если продукты не проходят должную обработку температурой. Известны случаи передачи инфекции насекомыми, которые прокусывают кожу и сосут кровь.

Риск заражения повышают такие факторы:

пренебрежение правилами гигиены;

контакт с экскрементами зараженного животного;

несоблюдение техники приготовления продуктов животного происхождения.

Изначально патология протекает бессимптомно. Первые признаки патологии могут появиться спустя несколько месяцев или даже лет после заражения.

У новорожденных распознать врожденную инфекцию можно по таким признакам:

желтушность кожных покровов;

сниженное количество тромбоцитов;

макулопапулезная сыпь на коже.

Инкубационный период заболевания длится около 2-3 недель. За это время у большинства пациентов вырабатываются антитела – специфические вещества, направленные на борьбу с возбудителем.

Острый токсоплазмоз напоминает поражение головного мозга и его оболочек. Наблюдается головная боль, тошнота, общая слабость, возможны судороги, появляется напряжение мышц затылка и пациент не может согнуть шею. Далее происходит поражение зрительного нерва, ухудшается зрение.

После этого может возникнуть миокардит. Это воспаление мышечной ткани сердца. Орган перестает нормально выполнять свою функцию, наблюдается острая боль в грудной клетке, перебои работы, нарушение ритма. Человек ощущает слабость, возможны потери сознания. Опасность миокардита заключается в том, что те ткани, которые были воспалены, могут замещаться рубцовым веществом. Состояние называется кардиосклерозом и является необратимым процессом.

Поражение пищеварительных органов сопровождается сухостью во рту, тупой болью в животе, вздутием, нарушением отхождения газов из кишечника. Снижается аппетит, может нарушаться стул.

Заболевание поражает работу эндокринных желез. Это отражается в нарушении менструального цикла, у мужчин снижается сексуальная функция, нарушается работа поджелудочной железы. Опасное осложнение болезни – привычное невынашивание беременности, которое может остаться у женщины на длительный срок.

Осложнениями со стороны глаз являются увеиты, хориоретиниты, близорукость.

Со стороны опорно-двигательного аппарата наблюдаются такие изменения, как боль в мышцах. Особенно беспокоит голень, бедро, поясница, мышцы шеи и рук. Боль возникает настолько резко и остро, что пациент перестает двигаться на некоторое время.

Из общих симптомов стоит отметить головную боль, высокую температуру, общую слабость, озноб. Происходит реактивное увеличение печени и селезенки, воспаляются лимфатические узлы, болят суставы и мышцы.

Хроническое течение сопровождается менее насыщенно клиникой, может быть бессимптомным. Температура если повышается, то совсем незначительно. Беспокоит тупая головная боль, слабость, может нарушаться память и умственная деятельность.

При обострении хронического процесса беспокоит озноб, лимфаденопатия. Осложнения затрагивают нервную систему, зрение. На фоне токсоплазмоза может возникать поражение организма другими инфекциями.

Как видим, болезнь или не имеет симптомов, что делает невозможным своевременную постановку диагноза, или имеет столько разных признаков, что сложно провести дифференциальную диагностику.

Диагностика токсоплазмоза показана в таких случаях:

скрининг в период планирования беременности и во время вынашивания плода;

появление лимфаденопатии неясного генеза у тех беременных женщин, кто ранее не болел или не проходил диагностику;

фетоплацентарная недостаточность и другие признаки внутриутробной инфекции;

возникновение энцефалита или менингита у пациентов с иммунодефицитом, онкологической патологией, на фоне приема цитостатиков или химиотерапии;

увеличение и болезненность лимфатических узлов;

увеличение в размерах печени и селезенки;

повышение температуры без явных причин;

признаки врожденного токсоплазмоза у ребенка.

На сегодняшний день постановка диагноза “токсоплазмоз” происходит на основе данных таких исследований:

Серологический метод (ИФА);

Каждый метод имеет свои особенные показания к применению. Рассмотрим их подробнее.

Серологический метод (ИФА)

Это иммунологическое исследование, в основе которого лежит реакция “антиген-антитело”. Метод позволяет оценить качественные и количественные показатели возбудителя в крови. Реакция происходит благодаря специфическим реактивам, которые добавляют к сыворотке крови пациента. Если антитела ихз крови реагируют на антиген, который есть в реактиве, значит диагноз можно считать подтвержденным. Методика широко распространена, используется для подтверждения клинических признаков токсоплазмоза.

Реакция иммунофлюоресценции основана на свойстве иммунных комплексов подсвечиваться иммунофлюоресцентным веществом. Если реакция происходит, медицинский работник видит специфическое свечение, оценивает его интенсивность и количественные показатели. Можно оценить поверхностные и внутриклеточные антигены. Метод входит в экспресс-диагностику, не занимает много времени и часто используется для постановки диагноза. Обязательным условием является специфическое оснащение лаборатории и навыки персонала.

Метод непрямой иммунофлюоресценции используется не так часто. Он позволяет определить тип антител в различных титрах сыворотки крови. Иммуноглобулины типа М говорят об острой стадии процесса, а антитела класса G – признак хронического течения или ранее перенесенного заболевания. Следует качественно проводить диагностику, ведь использование низких титров легко принять за ложноположительный результат.

Суть исследования заключается в непосредственном обнаружении возбудителя в биологическом материале. Для этого проводится исследование крови, слюны, спинномозговой жидкости, биоптатов. Обнаружить микроорганизмы можно с помощью специального окрашивания. Метод имеет неоднозначную оценку. С одной стороны, можно подтвердить наличие возбудителя, но сказать, как давно пациент болеет, в какой стадии процесс – сложно. К тому же, отсутствие паразитов в исследуемом материале не всегда говорит о том, что пациент не болен токсоплазмозом.

К сожалению, полностью устранить паразита из организма очень сложно. Токсоплазмы образуют цисты, в которых могут сохраняться в тканях длительное время. Они устойчивы к медикаментам. Особенно интенсивного лечения требуют пациенты с скомпрометированным иммунным статусом.

Методы профилактики заключаются в следующем:

соблюдение гигиенических правил;

полноценная кулинарная обработка продуктов животного происхождения;

своевременная диагностика домашних животных.

Лаборатория центра оснащена новейшим диагностическим оборудованием. Анализы выполняются быстро и качественно. В штате медицинских центров работают высококвалифицированные специалисты, что позволяет сделать диагностику разносторонней и эффективной. Пациент может не только установить факт заболевания, но и пройти расширенную проверку организма, а также лечение. Для наших врачей нет заболевания отдельной системы – они оценивают полноценное состояние пациента и лечат его, а не патологию. Есть возможность получить результаты исследования на личную электронную почту или получить их в распечатанном виде в медицинском центре.

Лаборатория АО “СЗЦДМ” предлагает услуги, обеспечивающие комплексное и преемственное лабораторное обследование пациента Диагностика В медицинских центрах АО “СЗЦДМ” проводят качественные диагностические исследования всего организма Лечение Наши медицинские центры ориентированы на обслуживание пациентов в амбулаторном режиме и объединены единым подходом к обследованию и лечению пациентов. Реабилитация Реабилитация – это действия, направленные на всестороннюю помощь больному человеку или инвалиду для достижения им максимально возможной полноценности, в том числе и социальной или экономической. Выезд на дом Внимание! Действует акция “Выезд на дом – 0 рублей” Профосмотры АО “СЗЦДМ” проводит профилактические осмотры работников, которые включают в себя – комплексы лечебных и профилактических мероприятий, проводимых для выявления отклонений в состоянии здоровья, профилактики развития и распространения заболеваний.

Читайте также: